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凱式定氮儀在食品中蛋白質(zhì)測定中的應(yīng)用

更新時間:2017-08-18      點擊次數(shù):2860
  1. 稱樣
 
  稱取固體試樣0.20~1.00g或半固體試樣1.00~2.00g或吸取2.00~10.00ml液體試樣(全量法約相當(dāng)?shù)?~25mg,微量法約相當(dāng)?shù)?0~200mg)。
 
  2. 消化
 
  將樣品移入干燥的250ml或500ml消化管,加0.2g硫酸銅與6g 硫酸鉀及12ml硫酸,搖勻后置于消化爐上,瓶口放一小漏斗或裝上毒氣罩接抽氣泵或尾氣吸收裝置后加熱,半固體、液體或含脂肪量較高的樣品初加熱時須小心控制,待內(nèi)容物全部炭化,泡沫*停止后,加強火力。全程約需定時40~60分鐘。消化液呈藍綠色澄清透明狀后加熱5~10分鐘。待消化管放涼后,用洗瓶沖洗管口,約用水20ml。
 
  3.蒸餾
 
  蒸餾裝置在每次開機后,打開冷凝水,設(shè)置好條件后空蒸一個樣品以清洗管路,全自動定氮儀要選擇好標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,一般為硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c( 1/2H2SO4)=0.1000mol/L或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液c(HCl)=0.1000mol/L,標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度也可根據(jù)氮含量作適當(dāng)調(diào)整。
 
  1)全量法:將消化好的試樣裝上蒸餾裝置的托架,拉下保護罩, K06樣品編號、 樣品量與試劑添加量設(shè)定好后(一般硼酸30~50ml,氫氧化鈉70~100ml)按運行鍵即可,在樣品滴定完成后鳴音提示,計算結(jié)果顯示于LCD屏幕上或通過RS232串口連接電腦直接打印正式的檢驗報告。K05與K02將硼酸與指示劑加于三角瓶中,K05設(shè)置好加堿量與蒸餾時間,在蒸餾完成后鳴音提示;K02按照預(yù)熱-加堿-蒸餾的順序,依次操作,堿量看后壁上的標(biāo)尺添加;蒸餾完成后再空蒸一分鐘,沖洗并移開三角瓶,開始滴定,記錄下酸標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗體積。
 
  2)微量法:將消化好的樣品移入100ml或250ml容量瓶中,并用少量水清洗消化管,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻備用。準(zhǔn)確吸取10.00~25.00ml試樣處理液于干凈的消化管中,余下步驟與全量法相同。
 
  4.結(jié)果計算
 
  X-------試樣中蛋白質(zhì)的含量,單位為克每百克或克每百毫升(g/100g或g/100ml)
 
  V1------試樣消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積,單位為毫升(ml)
 
  V0------試劑空白消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積,單位為毫升(ml)
 
  c------硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液濃度,單位為摩爾每升(mol/L)
 
  0.01401------1.0ml硫酸[c(1/2H2SO4)=1.000mol/L]或鹽酸[c(HCl) =1.000mol/L]標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量,單位為克(g)
 
  m------試樣的質(zhì)量或體積,單位為克或毫升(g或ml)
 
  V2------吸取試樣處理液的體積,單位為毫升(ml)
 
  V3------樣品消化液定容體積,單位為毫升(ml)
 
  F------氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。一般食物為6.25;乳制品為6.38;面粉為5.70;玉米、高粱為6.24;花生為5.46;米為5.95;大豆及其制品為6.25;肉與肉制品為6.25;大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83;芝麻、向日葵為5.30。
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